流动相中加离子对试剂改善色谱峰的分辨率并能调整保留值
发布日期：2014-07-08
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在反相色谱的流动相中加入与被分离的碱性或酸性组分相反的酸性或碱性的离子试剂，有人把这种色谱方法称为反相离子对色谱。
离了对试剂不能与被子测组分发生化学反应，也不能干扰被子测组分的色谱峰，不能产生介质效应，不能具有高紫外吸收性能。离子对试剂只能改善色谱峰的分离。
使用离子对试剂的原理还有些不明白，似乎配位化学的原理，放大了被测组分的特性。也可能是一种捕俘的原理，使被测组分更集中了。总之，增加了分离的效果。下面的原来被子分离的酸性和碱性组分的个性不突出，可能与其它的组分或杂质混在一起，缺乏自身的色谱选择性。加了相反的离子对试剂或以后突显出酸性或碱性组分的个性，能够跳出来“鹤立鸡群”，有了自身对称的峰形和与众不同的。
研究抗生素青霉素的药物动力学采用反相色谱反法定受试者用药后的血药浓度，开始仅用磷酸盐缓冲液-甲醇作为流动相，测得青霉素的色谱峰较宽，所得的结果用计算青霉素药物动力学参数与文献报道的差异较大。在流动相中加入0.2mol/L的四丁基氯化铵离子对试剂后，在原青霉素色谱峰后又分出一小峰。这才是真正的青霉素。用加离子对试剂测定的结果计算青霉素药物动力学参数，比较符合规律。
用两种方法测定的血药浓度（c）对给药时间（t）作1gc-t.不加离子对试剂，青霉素的药物半衰期（t0.5）＞30min。加离子对试剂，青霉素的药物半衰期在12—18min之间。
加入流动相中离子对浓度视其分子的大小而定。大分子的离子对试剂更佳浓度为5mmo/L或更小，小分子的离子对试剂的浓度应大于5mmol/L。从下面的例子可以看加入流动相中离子对试剂的浓度对分离的影响。用反相色谱分析某食品中的芝麻酸和防府剂，采用小分子的四丁基磷酸铵作为离子对试剂，＜12mmol/L分离很差。综上所述，在反相色谱的流动相中加酸或碱改良剂，加缓冲物质对，加离子对试剂，这些加在一起会不会乱套呢？不会，它们各司其职，一般来说互不干扰。例如同时加改良剂乙酸和三乙胺就各起各的作用。
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